试管婴儿胚胎是如何冷冻的？试管婴儿为什么需要冷冻胚胎？胚胎玻璃化冷冻后的复苏流程

在医学的神奇领域里，每一次突破都像是打开了一扇通往未知世界的大门。近日，宁波的王女士为我们带来了这样一则令人振奋的消息——她顺利生下了一个5斤多的健康宝宝。

而这个宝宝的特别之处，不仅在于他的降生，更在于他的“年龄”，刚出生就已经“15岁”。

一个人竟然有两个年龄? 这是怎么回事? 实际上，他是一个已经沉睡了15年的冷冻胚胎，被医学唤醒后植入王女士体内，成为了名副其实的“超长冻龄宝宝”。

冷冻胚胎技术，作为现代医学的一项伟大发明，为无数不孕不育家庭带来了希望。然而，能够成功唤醒并植入母体，让胚胎继续发育成长的案例并不多见。且根据冷冻胚胎保存时限的中国专家共识推荐，胚胎冷冻保存少于6年不影响胚胎复苏后存活率，着床率、妊娠率，活产率和子代出生缺陷率。胚胎冷冻保存时限推荐不超过10年。

这个宝宝的降生，无疑是对冷冻胚胎技术的一次巨大突破，也是对医学界的一次挑战。回溯15年前，当这个胚胎被冷冻保存时，谁也不曾想到他会在未来某一天苏醒，并以全新的生命姿态来到这个世界，这不仅是对医学技术的考验，更是对生命的一次深刻思考。

生命，到底是如何在冰冷的保存液中维持其潜在活力的？

又是如何在被唤醒后，依然能够保持其旺盛的生命力？

（液氮罐——储存生命的“生育银行”）

想要解答这些问题，得先了解冷冻胚胎的整个流程，所以，今天小橄榄来简单介绍一下。

1、胚胎是如何冷冻的？

第一步，胚胎师将体外受精后且发育情况良好的胚胎挑选出来。

第二步，在梯度冷冻液中让胚胎脱水，避免冷冻瞬间产生的冰晶伤害到本体。

第三步，把处理好的胚胎放进冷冻液的小管，然后放进-196℃的液氮中保存。

第四步，把盖子盖好并每24小时监测液氮水平，确保胚胎宝宝不会受到温度变化的影响。

2、为什么需要冷冻胚胎？

有以下适应症的患者，可以选择将胚胎冷冻保存，等待合适时机解冻移植胚胎。

✅内膜问题

患者存在内膜过薄、太厚、不均匀，或内膜形态不好、三线不清、内膜线中断等情况。

✅盆腔环境问题

患者盆腔存在慢性炎症、输卵管积水、巧克力囊肿等病变时。

✅卵巢过度刺激（OHSS）

一些年轻或者是卵巢储备功能非常好的患者，或多囊卵巢综合征的患者，在促排卵过程当中，由于多个卵泡同时发育生长，个别的病人会发生腹胀、腹水等卵巢过度刺激的症状。

✅高龄和卵巢储备功能低下

卵巢功能低下的病人，通常卵巢内卵母细胞的储备极度匮乏，每次获得的卵子和形成的胚胎都很少，就需要积攒一定的数量以后再进行移植。

✅其他妇科疾病

当发现有雌激素依赖性肿瘤或怀疑有癌前病变等需要观察治疗的病变。

3、胚胎玻璃化冷冻后的复苏流程

🔹准备清洗胚胎用的培养皿和蔗糖溶液

首先制作清洗复苏后胚胎的培养皿，静置在CO2培养箱内30分钟以上，稳定内部气体。

预先在CO2培养箱内加热0.25M蔗糖溶液。

🔹胚胎的复苏

从液氮储存器内取出冻存的EP管后，立刻打开盖子，倒掉EP管内的液氮，在室温下静置30秒。

用自动移液器把0.9mL已预热到37℃的0.25M蔗糖溶液添加进EP管内，在蔗糖溶液完全溶进冻存液前要迅速移液（10次左右）。

融解后的冻存液在常温下细胞毒性很强，因此需要迅速往EP管内添加0.25M蔗糖稀释冻存液。

🔹移液

如下图所示，首次移液需迅速把0.9mL 0.25M蔗糖溶液转移至EP管内加热（请注意如果枪头的尖端接触冻存液，枪头内的蔗糖溶液会冻结并阻塞在枪头的尖端）。

第二次以后的移液，就按照下图蓝色箭头所示小幅度移液。此外，第二次以后的移液，以免损坏胚胎，应小心且迅速有序地移液加热胚胎。

使用自动给移液器，将冻存液和蔗糖溶液的混合溶液移至培养皿上，接着用0.4~0.5mL的0.25M蔗糖溶液清洗EP管。

注意：移液时，尽量避免产生气泡。

胚胎复苏时移液要点：移液过程中如果枪头内有气泡，混合溶液移至在培养皿后，溶液表面产生的大量气泡会导致难以在显微镜下观察胚胎，无法取回胚胎。

直接从混合溶液里取出胚胎，小心地导入预先制作好（清洗前30分钟以上开始准备）、清洗胚胎的培养皿上的KSOM/AA滴液里，静置在培养箱内10分钟。

用剩下的KSOM/AA滴液清洗胚胎两遍。

注*：不同的冷冻技术，胚胎解冻的流程都有所差异。

关于胚胎冷冻就先介绍到这里，相信通过本次科普，大家也了解了不少冷冻胚胎知识。

最后，小橄榄也不免要感慨，先进的冷冻胚胎技术锁住了生命的年龄，延长了生育的期限，增加孕育的可能性。这个“超长冻龄宝宝”的降生，无疑为我们提供了一个宝贵的范例。让我们看到医学技术与生命之间的和谐共生，也坚信，在科技的力量下，生命将会绽放出更加绚烂的光彩。

时间不会冲淡想念，只会增加爱意，希望先进的胚胎冷冻技术为更多的家庭实现“一胎、二胎、三胎”的梦想！